男同 性愛 MDBK(NBL-1)牛肾细胞的处置治安及设施-质粒载体网
发布日期：2024-11-04 06:05 点击次数：165
一、细胞简介： 细胞称呼：MDBK(NBL-1)牛肾细胞 平台编号:zl-056503 1957年２月18日，S.H.Madin和N.B.Darby从一只表不雅平淡的成年牛肾脏缔造了MDBK细胞株。1973年这株MDBK细胞被牛病毒性痢疾病毒(BVDV)感染。1982年发现了一株未被BVDV感染的MDBK细胞株。这株细胞当先来自ATCC1967年７月第96代的冻存管。这株MDBK细胞的后代经NVSL检测，未发现被任何病毒欺凌的把柄。1982年８月，R.A.VanDeusen将其提供给ATCC时，已传代至第110代。这株细胞未被BVDV感染。 细胞特质 1）开始：牛肾平淡细胞 2）方式：上皮细胞样，贴壁滋长 3）含量：>1x106细胞数 4）规格：T25瓶有时1mL冻存管包装 5)用途：仅供科研使用。 二．培养基及培养冻存条目准备： 1）准备1640培养基；优质胎牛血清，10%；双抗，1%。 2）培养条目：气相：空气，95%；二氧化碳，5%。温度：37摄氏度，培养箱湿度为70%-80%。 3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配。 三．细胞处置： 1）冻存细胞的复苏： 将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中马上摇晃解冻男同 性愛，加入到含4-6mL全王人培养基的离心管中夹杂均匀。在1000RPM条目下离心3-5min男同 性愛，弃去上清液，全王人培养基重悬细胞。然后将细胞悬液加入含6-8ml全王人培养基的培养瓶（或皿）中37℃培养过夜。第二天显微镜下不雅察细胞滋长情况和细胞密度。 2）细胞传代：要是细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。 关于贴壁细胞传代不错参考以下治安： 1.弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。 2.加入0.25％（w/v）胰卵白酶-0.53mMEDTA于培养瓶中（T25瓶1-2mL，T75瓶2-3mL），置于37℃培养箱中消化1-2分钟（难消化的细胞不错合适延迟消化时刻），然后在显微镜下不雅察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并零散，马上拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加入3-4ml含10
